- 王曼;苏铁芬;马文擎;栗妍;项涛;何福仙;濮德敏;刘丽江;钟刚;王世宣;黎宁;
目的:探讨阴道发育异常的临床特征和诊治情况。方法:回顾性分析2002年至2011年在我院就诊的247例阴道发育异常患者的临床资料。结果:247例阴道发育异常患者中先天性无阴道173例(70.04%),阴道闭锁65例(26.32%),阴道隔膜9例(3.64%)。临床表现主要为无月经来潮(96.4%)、腹痛(32.4%)和性生活困难(8.9%)。其中合并子宫畸形患者201例(81.4%),行肾脏B超184例中合并肾脏畸形患者19例(10.3%)。247例阴道发育异常患者中235例行手术治疗。结论:阴道发育异常以先天性无阴道所占比例最大,可伴有子宫发育畸形和泌尿系统畸形,伴发畸形的诊断有重要临床意义。阴道发育异常患者大多需手术治疗,具体术式根据病变类型决定。
2012年11期 v.21 825-828页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K] [阅读次数:931 ] |[下载次数:286 ] |[引用频次:6 ] - 杨超;张虹;刘宋宋;
目的:探讨宫颈锥切术在宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ)的诊断与治疗中的价值。方法:回顾性分析因宫颈CINⅢ行宫颈锥切术的患者320例,采用自身对照法,对比研究宫颈锥切术和阴道镜下活检的病理结果。结果:宫颈锥切术与阴道镜下检查的病理结果完全符合者187例(58.44%),不符合者133例(41.56%)。锥切术后病理诊断级别下降者69例(21.56%),漏诊微小浸润癌60例(Ⅰa1期55例,Ⅰa2期5例)(18.75%),漏诊浸润癌(Ⅰb1期)4例(1.25%)。59例患者再次行子宫切除术,其中32例(54.24%)术后病理转阴,16例病理诊断级别降低。宫颈锥切术的主要并发症是术后出血。结论:宫颈锥切术在CINⅢ的诊断和治疗中具有重要价值。应根据患者年龄、病变程度、切缘状态、生育要求等多方面个体化、综合考虑以决定进一步的治疗方案。
2012年11期 v.21 829-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K] [阅读次数:955 ] |[下载次数:194 ] |[引用频次:20 ] - 张丁丁;周楠;吴小华;杨旭;卫晓娟;李梦轩;
目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)与卵巢癌SKOV3细胞顺铂耐药的相关性。方法:建立人卵巢癌细胞系SKOV3异种移植瘤模型,其中部分用顺铂处理;由此模型获得细胞分为SKOV3-P组(未化疗组)和SKOV3-R组(化疗组)。采用免疫细胞化学法和流式细胞术检测瘤细胞中IGF-1和IGF-1R的表达差异;MTT法和流式细胞术分别检测不同浓度顺铂(0、1、5、10、15、20μg/ml)和IGF-1R抑制剂NVP-AEW541(0、1、5、10、20μmol/L)单独及联合应用对瘤细胞的增殖及凋亡的影响。结果:SKOV3-P组、SK-OV3-R组细胞中均表达IGF-1和IGF-1R,且SKOV3-R组细胞的表达均显著高于SKOV3-P组细胞(P<0.05);NVP-AEW541对SKOV3-P组、SKOV3-R组细胞均表现增殖抑制,呈现剂量-时间依赖关系;NVP-AEW541联合顺铂作用瘤细胞时抑制作用显著增强,移植瘤细胞的顺铂敏感性显著增加(P<0.05);流式细胞术检测联合用药组细胞(10μmol/LNVP-AEW541+10μg/ml顺铂)凋亡率明显高于对照组和单独用药组(10μmol/L NVP-AEW541),且SKOV3-P组细胞的抑制率和凋亡率均显著高于SKOV3-R组细胞(P<0.05)。结论:IGF-1R参与了化疗耐药过程,通过NVP-AEW541抑制IGF-1R可能逆转卵巢癌细胞的顺铂耐药。
2012年11期 v.21 833-837页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] [阅读次数:1158 ] |[下载次数:117 ] |[引用频次:2 ] - 朱根海;王圣坦;杨照新;蔡俊宏;陈春英;姚茂忠;洪澜;贺国丽;杨舒盈;
目的:获取人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤癌旁正常卵巢组织,经安全筛查并冻融后移植至去势裸鼠体内,探讨移植后效果,为临床应用提供依据。方法:将人卵巢上皮癌OVCAR3细胞种植于裸鼠皮下以获取瘤源,并进行卵巢原位移植,建立卵巢癌原位移植瘤模型,解剖裸鼠获取癌旁正常卵巢组织。癌旁组:取筛选后的癌旁卵巢组织进行玻璃化冷冻,复苏后分别进行皮下及原位移植,各20例;对照组:同龄正常裸鼠卵巢组织,皮下移植及原位移植各20例;去势裸鼠组:20只同龄去势裸鼠;正常卵巢组:20只同龄正常裸鼠。移植12周后,分析各组裸鼠卵巢组织内卵泡形态及激素分泌功能。结果:40只人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤模型中共获取35份活检正常的癌旁卵巢组织,获取率87.5%(35/40)。玻璃化冷冻前后卵巢组织中卵泡形态及各级卵泡比例均无显著差异(P>0.05),癌旁冷冻组织和癌旁新鲜组织的异常卵泡比例差异无统计学意义(P>0.05),冷冻组织以初级卵泡及次级卵泡等窦前卵泡为主。癌旁组皮下移植组织存活率80%(16/20),对照组皮下移植组织存活率90%(18/20),癌旁组原位移植组织存活率90%(18/20),对照组原位移植组织存活率95%(19/20)。移植后组织内卵泡以次级卵泡及窦状卵泡为主,各级卵泡的形态及构成比和未移植的同龄正常裸鼠卵巢相似(P>0.05);癌旁组卵泡数明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植组织内的各级卵泡数差异无统计学意义(P>0.05)。癌旁组卵泡刺激素水平明显低于去势裸鼠组,而雌二醇水平明显高于去势裸鼠组(P<0.01);癌旁组卵泡刺激素水平明显高于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01),而雌二醇水平明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植的卵泡刺激素水平和雌二醇水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:癌旁卵巢组织冻融移植后有正常卵泡发育及激素分泌功能;皮下移植和原位移植均可取得较好的效果;癌旁卵巢组织冻融移植有望作为卵巢上皮癌患者治疗后恢复卵巢内分泌功能的有效手段。
2012年11期 v.21 838-842页 [查看摘要][在线阅读][下载 385K] [阅读次数:1230 ] |[下载次数:83 ] |[引用频次:1 ] - 孙蓬明;宋一一;陈小芳;毛晓丹;林芬;董滨华;
目的:分析并比较卵巢癌细胞中与肿瘤转移、侵袭相关的转录因子。方法:采用细胞划痕及小室跨膜实验比较卵巢癌细胞HO-8910及其高转移株HO-8910PM的转移侵袭能力差异;采用高通量转录因子活性检测芯片(DNA/蛋白结合芯片)分析并比较两种细胞中转录因子的活化情况,明确与肿瘤侵袭、转移相关表达的转录因子;用转录因子酶联免疫活性分析方法验证芯片检测结果。结果:细胞划痕实验及侵袭实验表明HO-8910PM比HO-8910细胞转移侵袭能力强,在345个转录因子中共筛选出与肿瘤侵袭、转移相关的31个表达差异转录因子。HO-8910PM细胞与HO-8910细胞相比,表达上调的有13种,下调的有18种。v-Maf仅表达于HO-8910PM,HLF仅表达于HO-8910。结论:v-Maf、HLF等31种转录因子可能参与了卵巢癌侵袭转移的相关机制。
2012年11期 v.21 843-847页 [查看摘要][在线阅读][下载 373K] [阅读次数:1059 ] |[下载次数:161 ] |[引用频次:4 ] - 王红英;王景苗;靳卫国;林丽;陈海英;
目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)靶向沉默趋化因子受体4(CXCR4)基因对卵巢癌SW626细胞增殖、迁移及侵袭的影响,为卵巢癌的基因治疗提供新的理论依据。方法:构建CXCR4干扰RNA质粒载体,重组扩增后转染CXCR4阳性的人卵巢癌细胞株SW626,以RT-PCR和Western blot检测CXCR4基因及蛋白表达的变化,MTT检测CXCR4干扰质粒对卵巢癌细胞增殖的影响,Transwell检测CXCR4干扰质粒对卵巢癌细胞迁移、侵袭能力的影响。结果:转染48h后,人卵巢癌细胞株SW626的转染效率为80%~90%,抑制了卵巢癌细胞CXCR4基因及蛋白的表达(P<0.05),部分抑制了癌细胞的增殖(P<0.01),但此作用并不随时间变化而有明显变化;癌细胞的迁移及侵袭率均明显下降,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:CXCR4 siRNA可通过下调CXCR4的表达抑制人卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭。
2012年11期 v.21 848-851+856页 [查看摘要][在线阅读][下载 513K] [阅读次数:1154 ] |[下载次数:185 ] |[引用频次:6 ] - 王云飞;狄文;邱丽华;
目的:制备一种具有靶向新生血管特点的载TNP-470纳米粒,观察其对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的靶向性及增殖的影响,观察其对肿瘤组织的靶向性以及治疗效果。方法:采用单乳法制备载TNP-470纳米粒,并将其共价偶联血管内皮生长因子(VEGF),命名为TNP-470-NPs-VEGF。透射电镜下观察TNP-470-NPs-VEGF的形态,纳米粒度分析仪检测其大小。CCK-8试剂盒检测对HUVECs的细胞毒作用,荧光显微镜观察HUVECs对纳米粒的摄取。观察静脉注射后对肿瘤的靶向性,以及对荷瘤裸鼠的治疗效果。结果:TNP-470-NPs-VEGF形态近似球形,直径为115~130nm。细胞摄取结果显示,VEGF修饰的纳米粒能明显被细胞所摄取,且呈浓度依赖性;CCK-8结果显示,VEGF修饰的载TNP-470靶向纳米粒能够明显抑制HUVECs细胞的生长,且呈浓度依赖性。SKOV3荷瘤裸鼠体内实验发现,TNP-470-NPs-VEGF的肿瘤靶向性好,能显著抑制肿瘤的生长。结论:成功制备得到的TNP-470-NPs-VEGF,能显著增强HUVECs细胞的摄取,抑制细胞增殖,对裸鼠体内的人卵巢癌SKOV3肿瘤具有明显的靶向性,能显著抑制肿瘤的生长。
2012年11期 v.21 852-856页 [查看摘要][在线阅读][下载 576K] [阅读次数:1133 ] |[下载次数:118 ] |[引用频次:1 ] - 孙丽;韩莉;石慧;谭超;神谢静;刘朝奇;
目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)对高表达P2X7受体的人宫颈癌Caski细胞(Caski-P2X7)生长及凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。方法:选择本实验室建立的Caski-P2X7细胞和对照Caski-3.1细胞(转染空载体质粒),用不同浓度ATP分别处理两种细胞株,MTT法检测细胞生存率,荧光染色法检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率;用2.5mmol/L ATP处理两种细胞后,Western blot检测凋亡相关蛋白(细胞色素C,bcl-2,Bax)的变化。结果:不同浓度ATP作用后,两种细胞生存率及线粒体膜电位均降低,而细胞凋亡率升高,均呈浓度依赖性;同一浓度ATP作用后,Caski-P2X7细胞生存率及线粒体膜电位均显著低于Caski-3.1细胞(P<0.05),但细胞凋亡率显著高于Caski-3.1细胞(P<0.05)。2.5mmol/L ATP处理后,Caski-P2X7细胞胞质中细胞色素C及凋亡蛋白Bax表达量明显增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白bcl-2表达量明显减少(P<0.05)。结论:一定浓度的ATP可通过P2X7受体途径诱导宫颈癌Caski细胞凋亡。
2012年11期 v.21 857-860页 [查看摘要][在线阅读][下载 236K] [阅读次数:969 ] |[下载次数:108 ] |[引用频次:2 ] - 张丽志;温克;苏健;瞿全新;
目的:探讨脂联素对子宫内膜癌细胞增殖的抑制作用及AMPK/ERK信号传导通路的有关机制。方法:以10μg/ml脂联素作用子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞0~60min,Western blot检测脂联素作用不同时间后细胞AMPK及ERK的磷酸化程度。脂联素作用12,24h后,分别采用RT-PCR和Western blot检测Cyclin D1 mRNA和蛋白水平。脂联素作用48h,MTT法检测细胞增殖。结果:脂联素以时间依赖方式诱导子宫内膜癌细胞AMPK活化,脂联素作用5min后明显活化,并维持至30min(F=22.749,P=0.000),AMPK抑制剂复合物C可明显抑制脂联素诱导的细胞AMPK活化。脂联素以时间依赖模式抑制子宫内膜癌细胞ERK活化,作用5min ERK活化明显受抑制,并维持至少60min(F=13.802,P=0.000),复合物C明显阻断脂联素诱导的细胞ERK活性抑制。脂联素明显抑制Cyclin D1 mRNA转录和蛋白表达(P=0.003,P=0.000),复合物C明显阻断脂联素对细胞Cyclin D1 mRNA转录和蛋白表达的抑制作用(P=0.006,P=0.000)。脂联素明显抑制细胞增殖(P=0.001),复合物C明显阻断脂联素对细胞的抑制作用(P=0.002)。结论:脂联素可能通过AMPK/ERK/Cyclin D1途径抑制子宫内膜癌细胞增殖。
2012年11期 v.21 861-864页 [查看摘要][在线阅读][下载 272K] [阅读次数:1150 ] |[下载次数:421 ] |[引用频次:8 ] - 周燕飞;徐扬;龙玲;皮俏冰;徐婷;蔡净亭;林蓓蓓;张艳青;
目的:用小干扰RNA(siRNA)干扰人永生化宫颈鳞状上皮细胞系H8中脾酪氨酸激酶(syk)的表达,观察syk表达降低对细胞增殖和侵袭能力的影响,初步探讨syk在宫颈癌侵袭转移中所起的作用及其表达改变可能影响到的下游靶基因。方法:用siRNA syk干扰永生化宫颈上皮细胞内syk的表达,并以转染control siRNA的细胞作为对照,转染48h后,分别用qRT-PCR和Western blot方法评价干扰效果;在24,48,72h用MTT法检测干扰后细胞增殖情况;Transwell检测细胞侵袭能力;并用qRT-PCR和Western blot方法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。结果:siRNA干扰syk后能显著降低永生化宫颈上皮细胞系H8内syk mRNA及蛋白的表达(P<0.01)。Syk表达降低并未影响永生化宫颈上皮细胞系H8的增殖(P>0.05),但能使永生化宫颈上皮细胞系H8的侵袭能力显著增强(侵袭细胞数115.57±10.31 vs 39.76±8.79,P<0.01),且syk表达降低后MMP-9的mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01)。结论:syk表达降低导致永生化宫颈上皮细胞的侵袭能力增加,可能与其表达降低后使MMP-9表达增加相关,syk表达降低与宫颈癌的侵袭转移密切相关。
2012年11期 v.21 865-868页 [查看摘要][在线阅读][下载 262K] [阅读次数:1082 ] |[下载次数:107 ] |[引用频次:2 ] - 李春艳;丁建;刘海元;郎景和;
目的:应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术比较子宫内膜异位症(内异症)血清差异蛋白质,建立内异症血清差异蛋白质指纹图谱,筛选内异症血清学标志物。方法:选择在我院接受手术治疗的内异症患者73例,体检结果正常妇女48例,进行血清SELDI-TOF-MS检测,统计学分析检测差异蛋白质峰,构建诊断模型,并用盲法验证诊断模型。结果:内异症组与健康妇女血清差异蛋白质峰有26个,其中内异症组表达上调的13个,下调的13个。应用M/Z为5632 Da、8135 Da的两个蛋白质峰建立内异症诊断模型,诊断内异症的敏感性为98.00%,特异性为85.00%,阳性预测值为89.09%,阴性预测值97.14%,盲法验证敏感性为91.30%,特异性为92.86%。结论:应用SELDI-TOF-MS技术建立内异症血清蛋白质指纹图谱,建立诊断模型,对于内异症的诊断具有很高的价值。M/Z为5632 Da、8135 Da两个蛋白质峰有望成为内异症诊断的血清学标志物。
2012年11期 v.21 869-872页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K] [阅读次数:1145 ] |[下载次数:131 ] |[引用频次:4 ] - 董倩;李佩玲;孙美玲;刘梅梅;邱晓红;
目的:通过检测血管内皮生长因子(VEGF)、激酶插入区受体(KDR)在子宫内膜异位症(EMs)患者异位内膜、在位内膜及血清和腹腔液中的表达,探讨VEGF及KDR在EMs发病机制中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测并比较EMs异位内膜、在位内膜及对照组子宫内膜组织中VEGF及KDR的表达水平。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测并比较EMs组及对照组血清和腹腔液中VEGF及KDR的含量。结果:VEGF和KDR在EMs组异位内膜的表达明显高于在位内膜和正常内膜组(P<0.05),VEGF和KDR在在位内膜的表达明显高于正常对照组(P<0.05),且两者在EMs异位内膜的表达呈正相关(r=0.971,P<0.05)。EMs患者血清和腹腔液中VEGF及KDR含量明显高于对照组(P<0.01),临床分期较早(Ⅰ~Ⅱ)的EMs患者的血清和腹腔液中VEGF及KDR水平明显高于临床分期较晚(Ⅲ~Ⅳ)的患者(P<0.05)。EMs组腹腔液中VEGF及KDR浓度显著高于其血清中浓度(P<0.05)。结论:VEGF及KDR可能在EMs发生、发展过程中发挥了重要的作用,检测血清VEGF及KDR水平为EMs的早期诊断提供了一种新的可能方法,也为通过VEGF-VEGFR双靶向阻断血管来治疗EMs奠定了理论基础。
2012年11期 v.21 873-877页 [查看摘要][在线阅读][下载 258K] [阅读次数:990 ] |[下载次数:205 ] |[引用频次:7 ] - 刘芳;何援利;
目的:探讨模拟子宫内膜微环境体外诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向子宫内膜上皮细胞方向分化的可行性。方法:原代培养兔BMSCs并鉴定,提取子宫内膜条件培养液,用子宫内膜条件培养液和雌激素(β-雌二醇,1×10-7mol/L)体外诱导分化BMSCs,用细胞免疫荧光法和Western blot检测分化的BMSCs是否表达上皮细胞特异性标记蛋白。结果:兔BMSCs具有较强的增殖潜能,呈克隆性生长,表达CD44和CD90,表达率分别为99.91%、98.64%;不表达CD45。子宫内膜条件培养液和雌激素培养BMSCs5天后,大部分细胞形态由间质细胞向上皮样细胞分化;细胞免疫荧光鉴定诱导分化后的BMSCs表达角蛋白;Western blot检测实验组角蛋白表达量明显增加,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:子宫内膜条件培养液联合雌激素可以诱导兔BMSCs向子宫内膜上皮细胞方向分化。体外模拟的子宫内膜微环境在BMSCs向子宫内膜上皮细胞分化中起重要作用。
2012年11期 v.21 878-881页 [查看摘要][在线阅读][下载 305K] [阅读次数:1035 ] |[下载次数:554 ] |[引用频次:16 ] - 王康;陈素琴;李楠;童玲玲;田彩;
目的:研究不同剂量来曲唑对大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型的治疗作用及其对异位病灶中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:将建模成功的大鼠随机分为来曲唑组(低、中、高剂量组)、米非司酮组及生理盐水空白对照组。灌胃4周后采用自定义疼痛评分及阴道痛觉过敏实验评价大鼠疼痛情况;观察异位内膜生长情况;放射免疫法测定血清E2、P、T水平;应用免疫组化法检测TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、NF-κB mRNA的含量。结果:来曲唑各组异位病灶体积明显缩小或萎缩,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);来曲唑中、高剂量组与低剂量组、米非司酮组相比较,异位病灶体积缩小更明显(P<0.05)。治疗后各组大鼠血清E2、P水平均无显著差异(P>0.05),但来曲唑组大鼠血清T水平升高,且呈剂量依赖性(P<0.05)。来曲唑治疗后模型鼠疼痛评分降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且高剂量来曲唑组较米非司酮组疼痛减轻更明显(P<0.05)。在20、30、40mmHg阴道压力的刺激下,米非司酮组和来曲唑组大鼠的逃避率较空白组显著降低(P<0.05),较少发生痛觉过敏,而在压力为5、10mmHg时,各组间逃避率的差异无统计学意义(P>0.05)。各治疗组异位内膜中TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和mRNA的表达,均较空白组显著降低(P<0.05),尤以高剂量来曲唑组蛋白表达最低。NF-κB与TNF-α、IL-6的表达均呈正相关(P<0.05)。结论:来曲唑对大鼠异位病灶体积影响明显,可缓解EMs引起的疼痛。这可能是通过降低异位病灶局部雌激素水平,降调TNF-α、IL-6、NF-κB在异位内膜组织中的表达而发挥治疗作用的。
2012年11期 v.21 882-887页 [查看摘要][在线阅读][下载 276K] [阅读次数:1042 ] |[下载次数:274 ] |[引用频次:7 ]