孔北华教授,山东大学齐鲁医院副院长、山东大学医学院副院长、国家重点学科山东大学妇产科学系主任、山东大学齐鲁医院妇产科主任、省级重点实验室妇科肿瘤实验室主任、山东省泰山学者特聘专家、山东大学关键技术岗位教授、博士生导师。系中华医学会妇产科分会副主任委员,《中华妇产科杂志》副总编,中国医师协会妇产科分会副会长,国家执业医师考试临床医学试题委员会副主任委员,详细内容

论著

  • RhoA在卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移过程中的作用

    赵良平;王薇娜;张庆华;田训;黄磊;梁逢奇;熊国平;马丁;

    目的:探讨RhoA在卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移过程中的作用。方法:构建RhoA真核表达载体,以脂质体介导转染卵巢癌细胞SKOV3,用RT-PCR和Westernblot检测SKOV3RhoAmRNA及蛋白表达水平;Boyden小室体外侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果:转染RhoA的实验组与转染空载体的对照组比较,RhoAmRNA的表达丰度(RhoA/GAPDH)为12.01±1.72,明显高于对照组的6.81±1.24;RhoA蛋白的表达水平(RhoA/β-actin)为4.81±0.56,亦明显高于对照组的3.02±0.32,两者差异都有统计学意义(P<0.05)。Boyden小室体外侵袭实验中实验组与对照组平均侵袭百分数分别为(47.60±1.47)%和(22.60±2.40)%(P<0.05),比较划痕后0h与24h的宽度差,实验组和对照组愈合百分比分别为(65±6.4)%和(54±5.5)%(P<0.05);表明转染RhoA后,细胞侵袭和迁移能力明显增强。结论:RhoA增强了卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移能力。

    2008年05期 321-324页 [查看摘要][在线阅读][下载 247K]
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  • IGFBP-3对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的实验研究

    李艳辉;张晓燕;王泽华;汪宏波;

    目的:探讨外源性胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)对Ishikawa细胞增殖、凋亡的影响及在抗肿瘤中其能否与顺铂起协同作用,并初步探讨IGFBP-3对垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)表达的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测IGFBP-3、顺铂对Ishikawa细胞的抑制率,计算半数抑制浓度;用流式细胞仪检测两药单用及合用对Ishikawa细胞周期、凋亡的影响;RT-PCR法检测药物干预后PTTG1表达量的变化。结果:(1)IGFBP-3对Ishikawa细胞增殖有明显抑制作用(IC50=1.00±0.12),且与顺铂有协同作用(CI<1);(2)IGFBP-3干预后Ishikawa细胞凋亡是对照的4.5倍(P<0.05);(3)顺铂、IGFBP-3均能下调PTTG1基因的表达,且以顺铂的下调作用明显。结论:在子宫内膜癌的Ishikawa细胞,观察到IGFBP-3具抗增殖、促凋亡的作用;IGFBP-3可能作为一种抗肿瘤剂用于临床。

    2008年05期 325-328+331页 [查看摘要][在线阅读][下载 404K]
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  • 女性生殖系统腺瘤样瘤的临床病理分析

    罗军;董丹丹;朱鸿;

    目的:探讨女性生殖系统腺瘤样瘤的临床与大体病理特点及其鉴别诊断。方法:分析73例女性生殖系统腺瘤样瘤的临床表现及其大体形态等。结果:73例患者中,腺瘤样瘤发生于子宫者72例,其中子宫与卵巢冠同时发生者1例,另有发生于输卵管系膜1例。子宫腺瘤样瘤占同期子宫标本的2.4%,肿瘤多位于子宫浆膜下及近浆膜的子宫肌壁间,粘膜下少见。72例呈结节状,其中单发68例,多发4例,肿瘤直径1~5cm,余1例呈弥漫性生长。合并平滑肌瘤或腺肌病的比例为75%。临床表现无特征性,主要有月经紊乱21例,月经量增多17例,痛经27例,月经中期疼痛4例。大体检查可见特征性表现,肿瘤切面呈实性,灰白及灰黄色,质地较软,有网格与细小孔隙或小囊腔形成,小孔内有半透明稀粘液,肿瘤与周围肌层分界不清,无假包膜。镜下见肿瘤细胞组成形态不一的腺样及腔隙样结构,腔隙内衬以扁平或立方上皮细胞,伴平滑肌增生。免疫组织化学染色显示:56例肿瘤细胞间皮细胞抗体(Mc)和细胞角蛋白(cytokeratin,CK)均阳性。结论:女性生殖系统腺瘤样瘤为间皮起源,子宫为最常见的发生部位。子宫腺瘤样瘤的实际发病率远高于文献报道。临床及病理检查均易误诊和漏诊,应引起临床及病理医师的重视。免疫组化染色结果可作为诊断及鉴别诊断的重要参考依据。

    2008年05期 329-331页 [查看摘要][在线阅读][下载 101K]
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  • RhoC siRNA对宫颈癌SiHa细胞增殖和侵袭能力的影响

    贺晓琪;钱颖;蔡惠兰;田金华;王泽华;

    目的:探讨Ras相似物C(RashomologueC,RhoC)GTP酶对宫颈癌SiHa细胞增殖和转移的影响。方法:以人宫颈癌细胞株SiHa为研究对象,利用RhoC小干扰RNA对RhoC基因进行沉默,RT-PCR和WesternBlot检测转染前后RhoC的表达变化,MTT法比较细胞增殖能力的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。基质胶粘附实验比较细胞粘附率的变化,transwell体外侵袭实验比较细胞侵袭能力变化,体外迁移实验比较细胞运动能力的改变。结果:RhoCsiRNA明显下调RhoC基因的表达。RhoC表达下调后,SiHa细胞的增殖能力和凋亡率没有明显变化(P>0.05),SiHa细胞对基质胶的粘附率明显降低(P<0.01),SiHa细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.01),体外迁移能力显著降低(P<0.01)。结论:RhoC明显地促进了宫颈癌SiHa细胞株的体外粘附、侵袭和迁移,但对其增殖和凋亡没有显著作用。提示RhoC在宫颈癌的恶性进展中起重要作用。

    2008年05期 332-336页 [查看摘要][在线阅读][下载 849K]
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  • CA125阴性卵巢癌血清标志物差异蛋白质组学的研究

    赵群;段微;吴玉梅;钱小红;邓小虹;

    目的:通过二维差异凝胶电泳(2-DEDIGE)和基质辅助激光解吸离子化-飞行时间(MALDI-TOF/TOF)串联质谱差异蛋白质组学方法寻找CA125阴性卵巢上皮癌血清标志物,以提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度。方法:收集103例卵巢上皮癌,60例正常对照,63例卵巢良性肿瘤、63例盆腔良性病变的血清。按年龄匹配,选取6例CA125阴性卵巢癌和6例正常对照组的血清等容积混合。祛除血清高丰度白蛋白和IgG后进行2-DEDIGE。实验重复3次。通过DeCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点,MALDI-TOF/TOF鉴定差异蛋白质。分别用WesternBlot和ELISA方法验证获选的血清标志物。结果:(1)经2-DEDIGE实验得出有显著差异的蛋白质点41个,MALDI-TOF/TOF成功鉴定了其中的28个蛋白质点。上调最显著的蛋白质点为结合珠蛋白(haptoglo-bin,Hp),下调最显著的蛋白质为转铁蛋白(transferrin,Tf);(2)WesternBlot和ELISA验证结果显示,CA125阴性卵巢上皮癌血清Hp和Tf与正常对照有显著差异(P<0.001);(3)CA125+Hp+Tf联合检测(两者或两者以上阳性判断为阳性)诊断卵巢上皮癌的灵敏度和特异度高于CA125、Hp和Tf单独检测。结论:Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质,可作为卵巢上皮癌的血清标志物。CA125+Hp+Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度,有助于提高CA125阴性卵巢上皮癌的检出率。

    2008年05期 337-341页 [查看摘要][在线阅读][下载 384K]
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  • 5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞及印迹基因H19效应的初步研究

    卢林杉;李力;俞丽丽;易萍;李平;陈星云;刘苹;周元国;

    目的:研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞的生物学作用,观察JEG-3细胞H19表达变化与滋养细胞增殖、分化和侵袭等行为的相关性,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的调控。方法:应用MTT法检测不同浓度5-杂氮脱氧胞苷在不同时相下对JEG-3细胞增殖的影响。体外小室迁移实验观察5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞迁移的影响。荧光定量RT-PCR检测5-杂氮脱氧胞苷作用下JEG-3细胞H19mRNA表达的变化。结果:5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞增殖起抑制作用,在一定范围内与时间和剂量呈正相关。经100μmol/L5-杂氮脱氧胞苷作用24h后的JEG-3细胞迁移能力明显受限,迁移细胞数较对照组差异显著(P<0.01)。经5-杂氮脱氧胞苷作用后JEG-3细胞中H19mRNA表达增高,在一定范围内与时间和剂量呈正相关。结论:甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷可致H19mRNA过量表达,并进一步抑制滋养细胞的增殖和迁移能力。H19印迹基因表达上调与滋养细胞增殖抑制和迁移能力降低有关。

    2008年05期 342-345+349页 [查看摘要][在线阅读][下载 657K]
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  • 抑制mdr1基因对人宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

    任庆兰;吴永忠;陈晓品;李少林;

    目的:探讨用反义技术抑制癌基因mdr1对宫颈癌细胞(HeLa)放射敏感性的影响。方法:设空白组、mdr1正义寡核苷酸组和脂质体组(仅加入等量的脂质体)为对照组以及mdr1反义寡核苷酸组,用RT-PCR检测宫颈癌细胞处理前后mdr1表达水平的变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人宫颈癌HeLa细胞株集落形成率,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达。结果:mdr1反义寡核苷酸能有效地抑制mdr1癌基因的表达,经脂质体介导的mdr1反义寡核苷酸作用的宫颈癌细胞经60Coγ射线照射后其集落形成率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降,而凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,与对照各组比较有显著差异(P<0.05)。结论:mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低人宫颈癌HeLa细胞放射抗性。其辐射增敏作用可能与mdr1反义寡核苷酸增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关。

    2008年05期 346-349页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 卵巢癌SKOV3细胞培养液对脐血树突细胞前体细胞亚群的影响

    余艳;陈丽莉;叶枫;吕卫国;谢幸;

    目的:研究卵巢癌细胞培养上清能否诱导树突细胞前体细胞亚群比例发生变化。方法:以脐血来源的CD34+干细胞通过细胞因子FLT3-L(100ng/ml)、SCF(50ng/ml)的诱导在体外扩增分化为DC前体细胞(pre-DC)。培养并收集卵巢癌细胞株SKOV3上清,经透析法浓缩。将上清培养的pre-DC,经不同浓度上清(0%、25%、50%、75%、100%、150%)作用后,用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测pre-DC表面抗原CD123、CD11c、HLA-DR、CD80、CD86的表达。结果:上清促进CD11c和HLA-DR抗原的表达,不促进CD123、CD80、CD86抗原的表达。结论:卵巢癌细胞株上清影响两类DC前体细胞亚群的比例变化,可能通过此途径参与形成腹腔免疫缺陷。

    2008年05期 350-353页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K]
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  • 野生型p53抑制宫颈癌HeLa细胞的研究

    林亚;宋巧丽;郑飞云;

    目的:研究外源性野生型p53(wtp53)基因对宫颈癌HeLa细胞中的致癌基因环氧合酶-2(COX-2)的影响,以及抑制HeLa细胞生长的作用。方法:用脂质体介导的转染技术将野生型p53基因转染到HeLa细胞。实验分为2组,p53转染组(p53-HeLa组)和空白对照组(HeLa组),wtp53表达用逆转录-多聚酶链反应鉴定,并检测p53mR-NA和COX-2mRNA瞬时转染及稳定转染前后表达的变化。CCK-8染色法绘制细胞生长曲线。结果:野生型p53基因转染后HeLa细胞中的p53mRNA表达增加,COX-2mRNA表达减少。通过对细胞生长曲线的分析,转染后与转染前相比,生长明显减慢(P<0.01),wtp53对HeLa细胞有抑制作用。结论:外源性wtp53基因表达可抑制宫颈癌He-La细胞中COX-2mRNA的表达;wtp53可能通过抑制COX-2对宫颈癌HeLa细胞产生抑制作用,进而阻碍肿瘤的生长。

    2008年05期 354-357页 [查看摘要][在线阅读][下载 210K]
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  • 甘露糖结合受体在阴道上皮细胞抗念珠菌中的作用

    牛战琴;郑海雅;石一复;

    目的:研究小鼠阴道上皮细胞抗念珠菌的作用机制。方法:用酶消化法将动情间期C57小鼠阴道分离成单个阴道上皮细胞,用流式细胞术及3H-葡萄糖液闪计数法研究甘露聚糖、高碘酸及钙离子螯合剂EGTA对阴道上皮细胞与白色念珠菌粘附及阴道上皮细胞抗白色念珠菌作用的影响。结果:甘露聚糖组(3mg/ml)阴道上皮细胞与白色念珠菌的粘附率为(4.47±1.89)%,显著低于对照组的(14.16±2.17)%(P<0.05),阴道上皮细胞对白色念珠菌生长抑制率为(43.29±9.79)%,高于对照组的(34.81±10.02)%,但差异无显著性(P>0.05);高碘酸组粘附率为(12.27±2.17)%,与对照组的差异无显著性(P>0.05),抑制率为(2.2±2.07)%,显著低于对照组(P<0.05);EGTA组粘附率为(0.4±0.29)%,抑制率为(1.6±1.53)%,均明显低于对照组(P<0.05)。结论:小鼠阴道上皮细胞表面的甘露糖结合受体介导了与白色念珠菌之间的粘附,此受体蛋白上的糖链可能参与了阴道上皮细胞的抗白色念珠菌作用。

    2008年05期 358-361页 [查看摘要][在线阅读][下载 382K]
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  • 潍坊地区外阴阴道假丝酵母菌病相关危险因素研究

    刘艳;刘萍;牟召霞;

    目的:探讨外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC)的相关危险因素。方法:采用1∶1病例-对照研究设计,对200例真菌培养阳性的VVC患者及200例真菌培养阴性者或真菌培养阳性无症状的带菌者进行问卷调查,用Logistic回归分析方法筛选主要危险因素,并评估它们在VVC发病中的相对重要性。结果:Logistic回归分析提示非经期用护垫、VVC病史、口交、阴道冲洗、避孕套、近1个月应用抗生素、心情抑郁、口服避孕药、糖尿病等在VVC发病因素中具有统计学意义,且对VVC发病的相对影响依次减弱。结论:Logistic回归分析提示在VVC发病中具有统计学意义的因素,可能是外阴阴道假丝酵母菌病危险因素。

    2008年05期 362-365页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
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  • 子宫颈锥形切除术后全子宫切除95例临床分析

    谭先杰;吴鸣;张涛;马水清;沈铿;郎景和;

    目的:分析子宫颈锥形切除术(宫颈锥切)后全子宫切除的指征,重点探讨宫颈锥切后腹腔镜子宫切除(LH)的可行性、安全性和手术要点。方法:回顾性分析2005年11月~2007年10月北京协和医院开展的95例宫颈锥切后全子宫切除术的手术指征、手术时间、出血量、残余宫颈病理、术中及术后并发症等。结果:(1)95例宫颈锥切后全子宫切除中,80例为LH,15例为开腹子宫切除(AH)。患者年龄43.2±5.9岁,术前诊断包括宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ及以下18例(18.9%)、CINⅢ累腺35例(36.8%)、宫颈原位癌(CIS)23例(24.2%)、宫颈浸润性鳞癌ⅠA1期19例(20.0%);(2)15例AH和25例LH是在宫颈锥切6周后施术,55例LH是在宫颈锥切后72h内。LH组和AH组手术时间分别为60.8±17.1min和88.0±19.8min(P<0.01),术中出血分别为54.3±24.4ml和103.3±48.1ml(P<0.01)。LH组和AH组的术后住院时间为4.5±1.1天和5.8±1.4天(P<0.01);(3)子宫切除标本的阴道断端边缘均未见病变,但残余宫颈中48例(50.5%)存在持续性病变(39例为CINⅡ及以下病变,4例为CINⅢ,3例为CIS,2例为浸润癌);(4)全组无1例需术中/术后输血,无膀胱、输尿管和肠道损伤发生。LH组患者无1例中转开腹,但4例放置专用举宫器困难,其中1例发生子宫穿孔但未引起并发症;(5)宫颈锥切后72h内行LH的55例中,7例(12.7%)术后出现发热(超过38.5℃),宫颈锥切6周后行LH或AH的40例中,仅1例(2.5%)术后发热。LH组1例患者术后发生阴道残端出血。结论:全子宫切除是某些诊断性宫颈锥切患者锥切后再处理措施之一。对于宫颈锥切后全子宫切除,LH具有优势和特点,其手术时间短,术中出血少,术后住院时间短。正确放置LH专用举宫器最大限度地上举子宫、锐性分离子宫膀胱腹膜返折是减少锥切后LH并发症的关键。

    2008年05期 366-369页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K]
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  • 滴虫性阴道炎阴道局部细胞因子IL-2、IL-8、IL-13的变化

    孙玉凤;廖秦平;刘朝晖;张岱;

    目的:检测滴虫性阴道炎(trichomanasvaginitis,TV)患者阴道局部细胞因子白介素-2(interleukine-2,IL-2)、白介素-8(interleukine-8,IL-8)及白介素-13(interleukine-13,IL-13)的变化,探讨它们在疾病及机体免疫防御机制中的作用。方法:选取生育年龄女性滴虫性阴道炎患者40例(TV组)为研究组,同期选取健康体检无阴道炎症的健康育龄女性66例为对照组,用ELISA法检测这2组人群中阴道局部IL-2、IL-8、IL-13及免疫球蛋白E(immunoglobinE,IgE)的水平。结果:(1)与健康对照组阴道局部IL-2(7.24pg/ml)、IL-8(1796.99pg/ml)、IL-13(22.54pg/ml)水平相比,滴虫性阴道炎患者阴道局部的IL-2为8.80pg/ml,有升高趋势(P=0.11);IL-8为7119.00pg/ml,IL-13为36.43pg/ml,均显著升高(P(0.001,P(0.001);(2)滴虫性阴道炎患者阴道局部IL-2/IL-13显著下降(P(0.001);(3)与健康对照组IgE水平(0.89IU/ml)相比,滴虫性阴道炎组(1.05IU/ml)显著升高(P=0.008)。结论:(1)滴虫性阴道炎时阴道局部IL-2有升高趋势,IL-13及IgE升高,提示阴道局部细胞免疫及体液免疫在抗滴虫感染中均起作用;(2)滴虫性阴道炎时阴道局部IL-8升高提示阴道局部粘膜的先天免疫应答在抗滴虫感染中起重要作用;(3)IL-2/IL-13下降提示可能出现了Th1/Th2细胞的免疫功能失衡。

    2008年05期 370-372+375页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
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病例报告

消息

短篇论著

综述

  • 代谢组学在卵巢癌中的应用研究进展

    黄以萍;徐丛剑;

    代谢组学(metabonomics/metabolomics)是近年发展起来的对某一生物或细胞所有低分子量代谢产物进行定性和定量分析的新学科,卵巢癌的发生发展必然伴随着代谢改变,代谢组学能给卵巢癌代谢水平一个全景的信息,能够早期发现卵巢癌,并为提高卵巢癌患者的生存率及其治疗提供思路。

    2008年05期 379-381页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K]
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  • 乳杆菌对维持阴道微生态平衡的作用机理

    高文;陈琢;

    乳杆菌是阴道微生态系统中的优势菌群,目前的研究表明,乳杆菌在健康妇女阴道中的分离率最高,达50%~80%,其数量占阴道微生物的95%以上。乳杆菌通过替代、竞争排斥机制阻止致病微生物粘附于阴道上皮细胞,同时,还可分泌过氧化氢、细菌素、类细菌素和生物表面活性剂等抑制致病微生物生长,对维持阴道微生态平衡具有重要作用。

    2008年05期 382-384页 [查看摘要][在线阅读][下载 111K]
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  • 子宫内膜异位症的恶变

    张爱群;孙富国;王昭英;

    子宫内膜异位症的分子生物学研究已成为当今研究的热点,子宫内膜异位症为良性病变,但具有与恶性病变类似的浸润、转移和复发等分子生物学特征。现将有关子宫内膜异位症的恶变及相关问题作一综述。子宫内膜异位症恶变涉及不典型子宫内膜异位症、卵巢癌、基因异常、细胞凋亡、细胞的单克隆起源及二恶英等因素,故认为子宫内膜异位症可能是卵巢癌的癌前病变。

    2008年05期 385-388页 [查看摘要][在线阅读][下载 166K]
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  • Survivin在妇科肿瘤研究中的进展

    肖喜荣;李斌;

    Survivin是凋亡蛋白抑制家族的新成员。近年研究表明,Survivin在恶性肿瘤组织中有特异性的高表达,可能与肿瘤的发生、发展及预后有关。随着分子生物学的发展,近年对Survivin的研究逐步深入。现对近年来妇科肿瘤领域Survivin的研究进展作一综述。

    2008年05期 389-391页 [查看摘要][在线阅读][下载 120K]
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