现代妇产科进展

2013, v.22(10) 787-791

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Pin1siRNA对宫颈癌细胞SiHa增殖和凋亡的影响
Impact of Pin1 inhibition by siRNA on proliferation and apoptosis in human cervical cancer cell line SiHa

钱颖;贺晓琪;蔡惠兰;董卫红;王泽华;

摘要(Abstract):

目的:通过小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1)表达,探讨Pin1对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响。方法:构建pGPU6/GFP/Neo-Pin1 siRNA表达载体,脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中;实验设3组:实验组(SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组)、阴性对照组(SiHa/pGPU6-con组)和空白对照组(SiHa)。采用RT-PCR、Western blot法检测Pin1的表达;MTT法检测细胞增殖活性;原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果:转染SiHa/pGPU6-Pin1siRNA的SiHa细胞中,Pin1 mRNA和蛋白表达分别下调68.1%和54.8%,细胞增殖显著抑制。TUNEL显示典型细胞凋亡特征,SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的凋亡指数(AI)为(29.6±14.58)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(8.44±5.65)%]和空白对照组[(5.34±4.47)%](P<0.05)。SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的细胞凋亡率为(30.95±16.47)%,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(6.18±6.10)%]和空白对照组[(5.95±4.99)%](P<0.05)。结论:RNA干扰技术能特异高效的抑制Pin1基因的表达,Pin1基因的下调能抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示Pin1可能成为治疗宫颈癌的新靶点。

关键词(KeyWords): RNA干扰;肽基脯氨酰顺反异构酶;宫颈癌细胞;增殖;凋亡

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(No:81072134);; 上海市浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划(No:PWRq2010-05);; 同济大学青年优秀人才培养计划(No:2011KJ008)

作者(Authors): 钱颖;贺晓琪;蔡惠兰;董卫红;王泽华;

DOI: 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2013.10.006

参考文献(References):

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