现代妇产科进展

2014, v.23(02) 89-93

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宫颈癌细胞系及宫颈组织PTEN基因启动子区甲基化状态的检测与分析
Detection and analysis of methylation status at the PTEN promotor in cervical cancer cell lines and cervical tissues

杨晨曦;王宁;张婷;汪姗姗;闫丽萍;王言奎;

摘要(Abstract):

目的:探讨宫颈癌细胞系及宫颈组织中PTEN基因启动子甲基化状态对其表达的影响。方法:选取体外培养的4种宫颈癌细胞系HeLa、Caski、C-33A、HT-3,以及18例宫颈癌组织和8例宫颈正常组织为研究对象。应用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)联合TA克隆测序检测PTEN基因启动子甲基化状态;采用去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理体外培养的4种宫颈癌细胞系,RT-PCR法检测处理前后PTEN基因mRNA转录表达的差异,并与本课题组前期5-Aza-dC作用前后4种细胞系表达谱芯片PTEN基因的差异进行比较分析。结果:4种宫颈癌细胞系、宫颈癌组织及正常宫颈组织中PTEN基因启动子区均呈低甲基化状态;且宫颈癌组织与正常宫颈组织PTEN基因启动子甲基化水平无显著差异(T=34.5,P=0.720)。表达谱芯片中4种细胞系PTEN基因差异倍数均>0.5且<2。RT-PCR显示,5-Aza-dC处理前后4种细胞系中PTEN mRNA表达无显著差异(HeLa:t=0.384,P=0.738;Caski:t=0.073,P=0.949;C-33A:t=0.097,P=0.931;HT-3:t=0.073,P=0.542)。结论:宫颈癌组织及宫颈癌细胞系中未发现PTEN基因启动子区CpG岛的高甲基化,PTEN基因表达的差异与该基因启动子区甲基化无显著相关性。

关键词(KeyWords): PTEN;宫颈癌;甲基化;5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(No:81172480)

作者(Author): 杨晨曦;王宁;张婷;汪姗姗;闫丽萍;王言奎;

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DOI: 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2014.02.053

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