现代妇产科进展

2010, v.19(01) 17-20

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脂质体转染白介素-12基因至卵巢癌SKOV3细胞检测VEGF表达及抗肿瘤作用探讨
Liposome mediated mIL-12 gene transfected to ovarian cancer SKOV3 cells to discuss the determination of VEGF and mechanism of anti-tumor

刘娟;王晶;隋丽华;

摘要(Abstract):

目的:观察含mIL-12基因的质粒转染至SKOV3卵巢癌细胞,效应细胞存在情况下对卵巢癌细胞株血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:用脂质体转染技术将基因质粒及空质粒转染至SKOV3卵巢癌细胞(SKOV3/IL-12)及SKOV3/neo;用ELISA法检测IL-12及INF-γ的表达;用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)半定量法测定SKOV3/IL-12+S(脾细胞)0,12,24,36,48,60hVEGFmRNA含量;用ELISA法测定细胞培养上清液中VEGF蛋白含量及其抑制率。结果:基因转染至SKOV3可检测到IL-12蛋白表达;分泌的IL-12蛋白具有活性,使脾细胞产生INF-γ,12h时迅速出现,作用后24h表达量最高;SKOV3/IL-12细胞与脾细胞作用12h后即出现VEGFmRNA表达抑制,24h达到高峰,与对照组有显著差异(P<0.05);培养24h后上清中VEGF蛋白含量减少,与对照组有显著差异(P<0.05)。结论:将IL-12基因转染至SKOV3卵巢癌细胞并表达IL-12;分泌的IL-12蛋白具有活性,使脾细胞产生INF-γ;SKOV3/IL-12与效应细胞脾细胞作用后产生INF-γ能在核酸水平下调VEGF并能抑制VEGF蛋白的表达。

关键词(KeyWords): 白细胞介素12;卵巢肿瘤;血管内皮生长因子;基因治疗

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 黑龙江省青年基金资助项目(No:GC06C064)

作者(Authors): 刘娟;王晶;隋丽华;

DOI: 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2010.01.020

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